真核蛋白表達(dá)系統(tǒng)是我們比較常用的一種蛋白表達(dá)方式，它一般采用酵母、昆蟲(chóng)、哺乳動(dòng)物來(lái)進(jìn)行表達(dá)，所產(chǎn)生的蛋白和靶DNA具備高度的相似性，能夠誘導(dǎo)高效表達(dá)。但是其在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的可誘導(dǎo)性、生物利用率、劑量依賴性等方面有著較高的要求，所以，日常使用中需要權(quán)衡利弊后再來(lái)選擇。那么，在真核蛋白表達(dá)時(shí)，我們?nèi)绾芜M(jìn)行蛋白純化呢?

　　其實(shí)我們知道，無(wú)論是原核表達(dá)還是真核表達(dá)都需要進(jìn)行蛋白純化，這樣才能提升蛋白的作用效果，使其達(dá)到我們的使用需求。所以，蛋白純化，是蛋白表達(dá)過(guò)程中非常重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。

　　天然大分子蛋白純化：

　　通過(guò)蛋白特性，選擇合適孔徑的分子篩進(jìn)行純化，同時(shí)搭配陰離子柱或陽(yáng)離子柱，可以獲得純度高達(dá)95%的蛋白;

　　天然小分子分離純化：

　　通過(guò)分子篩過(guò)濾掉大部分的大分子，然后再使用大孔樹(shù)脂或反向樹(shù)脂純化小分子化合物，再通過(guò)HPLC和MS對(duì)小分子肽進(jìn)行篩選即可;

　　未知蛋白純化：

　　結(jié)合客戶提供的蛋白特性，選擇相對(duì)應(yīng)的方法，最后采用質(zhì)譜鑒定，看是否滿足用戶的需求。一般來(lái)說(shuō)，對(duì)于這種未知的蛋白質(zhì)，我們所采用的方法也不外乎如上兩種，或者結(jié)合使用的方式;

　　真核蛋白純化前客戶需要提供哪些支持?

　　1、基因序列。為了更好地制備蛋白，客戶需要提供準(zhǔn)確的基因序列，并告知蛋白標(biāo)簽及相關(guān)要求，同時(shí)告知蛋白的用途(一般來(lái)說(shuō)，制備的蛋白僅供研發(fā)使用，不適用于臨床使用);

　　2、提供質(zhì)粒。客戶需提供質(zhì)粒，且量不小于100ng，同時(shí)提供序列文件;

　　3、根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，蛋白序列、分子量、等電點(diǎn)等信息;

　　真核蛋白表達(dá)系統(tǒng)雖然說(shuō)獲得的蛋白特性更強(qiáng)、效果更好，但是相關(guān)投入以及技術(shù)需求就不是原核蛋白表達(dá)系統(tǒng)所能比擬的。當(dāng)然了，在蛋白制備完成后，所用的蛋白純化方法較為類(lèi)似，可以采用類(lèi)似的方法。普健生物專業(yè)為您提供真核蛋白表達(dá)及蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來(lái)電咨詢。